(資料圖片僅供參考)
1、1.一般來(lái)說(shuō)，較低的退火溫度可以提高pcr反應(yīng)的敏感性但特異性較差；而較高的退火溫度則可以提高pcr的特異性但卻降低了擴(kuò)增效率。
2、通常引物與模板的退火溫度在45-55度。
3、2.優(yōu)化退火溫度最好的方法是設(shè)置一系列對(duì)照反應(yīng)，即通過(guò)在低于計(jì)算出的引物Tm值2-10度的溫度范圍內(nèi)，進(jìn)行退火的一系列平行反應(yīng)來(lái)確定最佳退火溫度。
4、也可以通過(guò)touch down pcr來(lái)設(shè)定退火溫度，得到最佳退火溫度。
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